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[학사] Real time quantitative PCR 이용 안내

2009-07-15l 조회수 14057

Real time quantitative PCR 이용 안내

 

암연구소에 설치되어 있는 real time quantitative PCR (실시간 유전자 증폭 정량 측정 장치) 이용에 대하여 안내해 드립니다. 보유하고 있는 real-Time PCR (실시간 유전자 증폭 정량 측정 장치) 자세한 재원은 아래와 같으며, 기기담당 연구원이 분석을 도와드립니다. (전화 3668-7468).

Real-time PCR를 이용하실 분은 암연구소 홈페이지 (http://cri.snu.ac.kr)의 공용기기예약에서 예약하시고 사용설명서를 작성해서 담당자 이 메일로 보내주시면 됩니다.

예약날짜에 서울대학교 암연구소 9 911호에 sample(reference 포함), primer또는 probe(target, endogenous control)을 가져오신 후 담당자에게 신청하시면 됩니다.

Taqman probe endogenous control (Human)은 준비되어 있습니다.

 

모델명 : Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR Systems

제조사 : Applied Biosystems

 

Sample type : cDNA, DNA

< 분석항목 >

   SYBR Green

     Absolute Quantitiative PCR (Standard curve method)

     Relative Quantification PCR (Standard curve method, Comparative CT method)

   Taqman probe

     Absolute Quantitiative PCR (Standard curve method)

     Relative Quantification PCR (Standard curve method, Comparative CT method)

< 의뢰 시 체크사항 >

    Primer design

      - Tm 58-60

      - No more than 2 G+C's in last 5 bases on the 3' end

      - Amplicon length maximum = 150bp

    Probe design

      - Tm 10 higher than primers (68-70)

      - 5' base may not be G

      - Select probe with more Cs than Gs

      - Synthesize probe with a Reporter dye at the 5' end and Quencher Dye at the 3'end

    cDNA : 0.5-1.5/   

< 첨부사항 >

     Primer Probe 제작이 중요하므로 미리 문의하시면 도와드리겠습니다.

    ② 향후 RNA prep. DNA prep. 그리고 One-step RT-PCR, Molecular Beacon,

       SNP genotyping등을 추가적으로 분석을 도와드릴 예정입니다.

 

 

서울대학교 암연구소